氣相色譜定量分析原理

氣相色譜法是一種分離分析方法。操作時使用氣相色譜儀，被分析樣品（氣體或液體汽化后的蒸汽）在流速保持一定的惰性氣體（成為載氣或流動相）的帶動下進入填充有固定相的色譜柱，在色譜柱中樣品被分離成一個個的單一組分，并以一定的先后次序從色譜柱流出，進入檢測器，轉變成電信號，再經放大后，由記錄器記錄下來，在記錄紙上得到一組曲線圖（稱為色譜圖），根據色譜峰的峰高或峰面積就可以定量測定樣品中各個組分的含量。

氣相色譜的定量檢測方法一般有歸一化法、內標法和外標三種方法，其各有優缺點。歸一化法是將有機樣品中所有組分的含量之和定位100%，計算出其中某一組分含量的百分數，其方便簡單，樣品進樣量和流動相載氣流速等對計算結果影響不大，但要求每個組分色譜峰面積能準確地計算，因此僅適合組分少的有機樣品。內標法是向有機樣品中加入標準已知含量的純有機物（可以和樣品中組分相同，也可以不同）進行氣相色譜測定，然后利用欲測組分和內標物的色譜峰面積和定量校正因子進行定量分析，其避免了歸一化方法的缺點，但需要標準標準稱取有機樣品和內標物的重量，而且選用的內標物的選取要求較高。

外標法[14]是在進樣量、色譜儀器及操作等分析條件嚴格固定不變的前提下，先使用不同含量的組分純物質等量進樣進行色譜分析，求出純物質含量和色譜峰面積的關系，并繪出相應的定量校正曲線或給出線性方程式。然后將有機樣品在相同條件下進行色譜分析，并根據定量校正曲線或線性方程式，計算出所需組分的定量分析結果。外標法比較簡便，尤其適合相同樣品的大批量測試，這對工業化生產或環境中某種有機物的檢測或控制非常有效。但這一方法對液體或揮發性不好的有機物組分定量分析時，往往誤差較大。

從分析原理上講，液相色譜法和經典液相色譜（層析）沒有本質的差別，但由于它采用了新型高壓輸液泵、高靈敏度檢測器和微粒固定相，因而在操作和條件等方面已*不同。液相色譜法特點：⑴由于新型微粒固定相填料的使用，分離能力高；⑵由于液相色譜柱具有，并且流動相可以控制和改善分離過程的選擇性，選擇性高；⑶檢測靈敏度高；⑷由于高壓輸液泵的使用，相對經典液相色譜，分析速度快。另外，液相色譜適用于分析高沸點不易揮發、受熱不穩定、分子量大和不同極性的有機物，尤其是生物活性物質的天然產物和高分子化合物等。其缺點有：⑴使用多種溶劑作為流動相，分析成本高于氣相色譜法，且易引起環境污染，程序升溫操作復雜；⑵缺少如氣相色譜法中使用的通用性檢測器；⑶不適用于在高壓下易分解和變性的具有生物活性的生化樣品。

液相色譜的定性和定量分析原理和方法與氣相色譜基本相同。